GFP激發(fā)光源性能對(duì)比

GFP激發(fā)光源（EGFP激發(fā)光源）又叫綠色熒光蛋白激發(fā)光源、GFP激發(fā)光源是用于激發(fā)熒光蛋白發(fā)出熒光，通過(guò)便攜式熒光蛋白激發(fā)光源方便快捷觀察目的基因通過(guò)載體有沒(méi)有表達(dá)成功的檢測(cè)方法。市場(chǎng)有多家進(jìn)口GFP激發(fā)光源，為什么大家喜歡LUYOR-3415這款呢？

LUYOR-3415RG便攜式熒光蛋白激發(fā)光源觀察熒光蛋白的表達(dá)位置真心很方便，可以直接用于分選水稻、小麥、玉米、大豆、棉花、擬南芥的轉(zhuǎn)基因種子。能夠觀察BFP藍(lán)色熒光蛋白、GFP、EGFP綠色熒光蛋白、YFP黃色熒光蛋白、RFP、DsRed、mcherry、Tdtomato紅色熒光蛋白。美國(guó)LUYOR公司生產(chǎn)的LUYOR-3415RG雙波長(zhǎng)激發(fā)光源，可以激發(fā)GFP和dsRed的發(fā)出熒光。

轉(zhuǎn)基因光源/GFP熒光激發(fā)光源性能對(duì)比

經(jīng)常有客戶咨詢luyor-3415系列轉(zhuǎn)基因光源和其他光源對(duì)比優(yōu)勢(shì)在哪里，現(xiàn)把和進(jìn)口品牌某一型號(hào)的性能對(duì)比列表如下，僅供參考！

LUYOR-3415照射下觀察GFP在煙草上的表達(dá)（圖片由LUYOR-3415用戶提供，圖片版權(quán)歸屬上海路陽(yáng)生物技術(shù)有限公司，嚴(yán)禁盜用。）

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GFP熒光的激發(fā)光波長(zhǎng)和發(fā)射光波長(zhǎng)

GFP熒光的激發(fā)光波長(zhǎng)和GFP的發(fā)射光波長(zhǎng)因GFP的種類(lèi)不一樣，會(huì)有差別。

GFP綠色熒光蛋白在分子和細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用越來(lái)越多。由于應(yīng)用的多樣性，已經(jīng)開(kāi)發(fā)出形成原始野生型綠色熒光蛋白（wtGFP）的幾種變體。這些變體中的幾個(gè)具有與wtGFP不同的激發(fā)和發(fā)射光譜。

wtGFP綠色熒光蛋白zui常用的突變可分為三類(lèi)：

（1）紅移變體；
（2）像變體一樣的野生型；
（3）藍(lán)色發(fā)射變體。

如圖1所示，以EGFP為代表的紅移變體具有一個(gè)集中在約488  nm處的單個(gè)激發(fā)峰，發(fā)射峰波長(zhǎng)為509 nm。類(lèi)似野生型的變體的主要激發(fā)峰位于395 nm，發(fā)射峰位于509 nm，而發(fā)出藍(lán)色的突變體通常在380  nm附近有一個(gè)激發(fā)峰，在460 nm附近有一個(gè)發(fā)射峰（圖1）。

表1.GFP fluorescent protein變體的激發(fā)和發(fā)射數(shù)據(jù)

YFP的激發(fā)光波長(zhǎng)和發(fā)射光波長(zhǎng)

YFP激發(fā)波長(zhǎng)為510nm(Excitation)，更大發(fā)射波長(zhǎng)為527 nm

黃色熒光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體，zui初來(lái)源于維多利亞多管水母（ Aequorea victoria）。相對(duì)于綠色熒光蛋白，其熒光向紅色光譜偏移，而這主要是由于蛋白203位蘇氨酸變?yōu)槔野彼帷Ｆ涓蠹ぐl(fā)波長(zhǎng)為514 nm，更大發(fā)射波長(zhǎng)為527 nm。excitation wavelength and the emission wavelength for yfp.

Yellow  Fluorescent Proteins Excitation Emission

tdtomato fluorescent protein紅色熒光蛋白的激發(fā)光波長(zhǎng)

tdtomato熒光蛋白是屬于一種紅色熒光蛋白，可以用520nm的綠光激發(fā)(Excitation)，發(fā)射出的熒光為紅色。

tdtomato紅色熒光蛋白的激發(fā)光譜圖

RFP紅色熒光蛋白激發(fā)波長(zhǎng)

Red fluorescent protein簡(jiǎn)稱(chēng)RFP,RFP紅色熒光蛋白的激發(fā)光峰值為532nm(Excitation)，RFP紅色熒光蛋白的熒光峰值為588nm。

常規(guī)紅色熒光蛋白分為橙色熒光蛋白(550-570 nm),紅色熒光蛋白(570-620 nm)和遠(yuǎn)紅外熒光蛋白(>620 nm)3 種。mCherry是作為標(biāo)簽的好選擇,因?yàn)樗墓夥€(wěn)定性更強(qiáng)并且其具備良好的單體特性,細(xì)胞毒性低。DsRed是一種從珊瑚中分離出來(lái)的紅色熒光蛋白,具有熒光強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)勢(shì)。但其本身也存在許多問(wèn)題。例如,DsRed 寡聚狀態(tài)是四聚體,在進(jìn)行蛋白融合時(shí)容易形成多聚影響目標(biāo)蛋白，DsRed 在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)會(huì)產(chǎn)生毒性。

Red fluorescent protein (RFP) is a versatile biological marker for monitoring physiological processes, visualizing protein localization, and detecting transgenic expression in vivo. RFP can be excited by the 488 nm or 532 nm laser line and is optimally detected at 588 nm.

RFP紅色熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光光譜圖(Excitation Emission)

mCarmine紅色熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光光譜圖

dsred紅色熒光蛋白的激發(fā)光和發(fā)射光光譜圖

mcherry紅色熒光蛋白的吸收/發(fā)射峰分別位于587nm和610nm，

常用熒光蛋白的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng):

EBFP2，藍(lán)色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)383nm，發(fā)射波長(zhǎng)448nm；
mCelulean，青色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)433nm，發(fā)射波長(zhǎng)475nm；
EGFP，綠色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)488nm，發(fā)射波長(zhǎng)507nm；
EYFP，黃色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)513nm，發(fā)射波長(zhǎng)527nm；
mCitrine，黃色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)516nm，發(fā)射波長(zhǎng)529nm；
mCherry，紅色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)587nm，發(fā)射波長(zhǎng)610nm；
mRuby2，紅色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)559nm，發(fā)射波長(zhǎng)600nm；
tdTomato，橙色熒光蛋白，激發(fā)波長(zhǎng)554nm，發(fā)射波長(zhǎng)581nm；

 mcherry激發(fā)波長(zhǎng)(Excitation Emission)

 mcherry Fluorescent Proteins Excitation Emission

mCherry是一種來(lái)自于蘑菇珊瑚（mushroom coral）的紅色熒光蛋白，常有于標(biāo)記和示蹤某些分子和細(xì)胞組分。相對(duì)于其他熒光，mcherry的好處在于它的顏色和應(yīng)用zui多的綠色熒光蛋白（GFP）能進(jìn)行共同標(biāo)記，并且mcherry相對(duì)于其他單體熒光蛋白來(lái)說(shuō)也具有卓越的光穩(wěn)定型。

吸收和發(fā)射波長(zhǎng)：

mcherry的更大吸收/發(fā)射峰分別位于587nm和610nm，對(duì)光致漂白耐受，熒光非常穩(wěn)定。

 實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)熒光蛋白的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)

紫外熒光蛋白UV fluorescent protein   

藍(lán)色熒光蛋白Blue fluorescent protein   

青色熒光蛋白Cyan fluorescent protein   

綠色熒光蛋白Green fluorescent protein      

黃色熒光蛋白Yellow fluorescent protein   

桔色熒光蛋白Orange fluorescent protein   

紅色熒光蛋白R(shí)ed fluorescent protein   

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