熒光蛋白為什么被用作熒光標(biāo)簽?
因為熒光蛋白不但可以標(biāo)記固定細(xì)胞及活細(xì)胞中的蛋白,還可以標(biāo)記不同的細(xì)胞類型,甚至可以標(biāo)記亞細(xì)胞器。熒光蛋白因為顏色鮮艷,圖像直觀,不需要化學(xué)染色和底物,是活細(xì)胞分析的理想選擇。它常用于追蹤啟動子活性、產(chǎn)生穩(wěn)定細(xì)胞系、標(biāo)記細(xì)胞或細(xì)胞器用于體內(nèi)成像等。
怎么選擇合適的熒光蛋白做標(biāo)簽?
熒光蛋白作為熒光標(biāo)簽用于實驗研究要選擇適合的,不是任何一種都可以。
1)要考慮你選擇的這這個熒光蛋白的熒光顏色和你的本體顏色有大的區(qū)別,而熒光蛋白被激發(fā)后的顏色是由其發(fā)射波長決定的,激發(fā)它發(fā)出熒光也要選擇正確的激發(fā)光源波長。
2)如果做多重實驗,就必須確保這幾種熒光蛋白的發(fā)射波長不重疊。
3)另外要考慮實驗的對象,如果是體外實驗就無所謂,大部分波長都可以,但如果是體內(nèi)研究如小動物成像,要選擇那些在遠(yuǎn)紅外區(qū)的長波,它能有效穿透身體組織,發(fā)揮作用。
4)不同熒光蛋白適用于不同的實驗?zāi)康模喝缬械倪m合標(biāo)記細(xì)胞或細(xì)胞器,追蹤啟動子活性,有的適合構(gòu)建融合蛋白(蛋白定位研究和產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系用于長期培養(yǎng)),有的適合作為目的蛋白轉(zhuǎn)錄和翻譯的指示劑,有的適合三色分析,如黃、綠、紅三色熒光蛋白
上圖:GFPfinder-2101RB熒光手電筒篩選GFP陽性的小鼠(圖片轉(zhuǎn)自https://www.xepu.cn )
熒光蛋白激發(fā)光源都有哪些?
熒光蛋白在激發(fā)光源的激發(fā)下才能發(fā)出熒光進(jìn)行實驗的觀測及研究。不同的熒光蛋白激發(fā)光源不一樣,需要根據(jù)其激發(fā)波長選擇合適的激發(fā)光源。上海峰志儀器有限公司擁有多種熒光蛋白激發(fā)光源,有單波長激發(fā)光源,有雙波長激發(fā)光源,也有多波長激發(fā)光源,另外樣式可根據(jù)應(yīng)用場景選擇手電筒式、手持式、桌面式等。
熒光蛋白激發(fā)燈用于激發(fā)熒光蛋白發(fā)出熒光,研究人員通過觀測熒光并記錄以實現(xiàn)相應(yīng)的研究。熒光蛋白激發(fā)燈作為激發(fā)重要的一個工具該怎么選,上海峰志儀器有限公司教你3步選好:
先看熒光蛋白
不同熒光蛋白的激發(fā)波長是不一樣的,就算是同系列的熒光蛋白佳激發(fā)波長也是不一樣的。首先要了解被激發(fā)的熒光蛋白激發(fā)波長是多少?再選擇這個波長的激發(fā)燈,這樣激發(fā)出的熒光才足夠亮且穩(wěn)定。
用于什么場景
不同用戶對于熒光蛋白的應(yīng)用是不一樣的,如:種子篩選、植物愈傷組織觀測、轉(zhuǎn)基因驗證、細(xì)胞的運動……針對不同的使用場景需要的激發(fā)燈樣式不一,照射面積不一……
熒光蛋白激發(fā)燈廠家
確定了以上2步就差不多做好了功能選項,第三部就是看熒光蛋白激發(fā)燈廠家,通過售前、質(zhì)量、價格、服務(wù)、技術(shù)……綜合選擇
常見熒光蛋白激發(fā)波長如下:
1)紅色熒光蛋白RFP:激發(fā)波長532nm(綠光),發(fā)射波長588nm;
2)綠色熒光蛋白GFP:激發(fā)波長為 488 nm(藍(lán)光或紫光),發(fā)射波長507 nm;
3)藍(lán)色熒光蛋白BFP: 激發(fā)波長在400nm(紫)左右,發(fā)射波長在450nm左右;
4)黃色熒光蛋白YFP: 大激發(fā)波長為514 (綠光)nm,大發(fā)射波長為527 nm。
上海峰志儀器有限公司專注熒光檢測燈20年,銷售的美國路陽和析浦科學(xué)儀器的熒光蛋白激發(fā)光源有單光源、雙光源、多光源可選。熒光蛋白激發(fā)燈樣式從便攜手電式到大面積桌面式都有,研發(fā)的光學(xué)透鏡使其光照度超過同條件的其他檢測燈,另外也可根據(jù)用戶實際需求進(jìn)行定制。
上圖:GFPfinder-2101RB熒光手電筒
上圖:LUYOR-3415RG雙波長熒光蛋白激發(fā)光源
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