瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染有什么區(qū)別

瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染有什么區(qū)別

瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別在于，在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中，外源基因不整合到基因組中，而在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中，外源基因整合到基因組中。 此外，基因表達(dá)在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中發(fā)生的時(shí)間很短，而基因表達(dá)在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中發(fā)生較長(zhǎng)的時(shí)間，因?yàn)橥庠椿蚪?jīng)過(guò)幾代。  

瞬時(shí)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是將外來(lái)遺傳元件轉(zhuǎn)染成真核細(xì)胞的兩種方法。一般來(lái)說(shuō)，這兩種類(lèi)型的轉(zhuǎn)染在生物技術(shù)中都有重要的應(yīng)用。 

什么是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染 

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是一種轉(zhuǎn)染，其中外源基因進(jìn)入細(xì)胞但不整合到基因組中。因此，外來(lái)基因不會(huì)在真核細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制。因此，它會(huì)隨著時(shí)間的推移而降解，同時(shí)通過(guò)細(xì)胞分裂稀釋。瞬態(tài)轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要特征是它只允許短期基因表達(dá)。

圖1：GFP融合蛋白瞬時(shí)轉(zhuǎn)染到S2細(xì)胞中

此外，一般來(lái)說(shuō)，用于轉(zhuǎn)染基因的載體也具有報(bào)告基因，可以監(jiān)測(cè)真核細(xì)胞內(nèi)外源基因的表達(dá)。此外，報(bào)告基因允許監(jiān)測(cè)細(xì)胞內(nèi)外源基因的存在。 

什么是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是另一種類(lèi)型的轉(zhuǎn)染，其中外源基因通過(guò)整合到染色體或染色體外表觀體中并入真核細(xì)胞的基因組。因此，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的主要特征是它允許外源基因代代相傳。此外，由于整合到基因組中，外源基因在細(xì)胞系內(nèi)持續(xù)更長(zhǎng)的時(shí)間，從而產(chǎn)生“高而穩(wěn)定的基因表達(dá)。

圖2：穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

此外，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中的整合構(gòu)建體包含可選擇的創(chuàng)客，以識(shí)別成功整合到基因組中的構(gòu)建體以及基因表達(dá)水平。 

瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的相似性 

瞬時(shí)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是將外源基因引入真核細(xì)胞的兩種方法。 外源基因的表達(dá)發(fā)生在這兩種方法中。 此外，這些方法在生物技術(shù)中具有不同的應(yīng)用。 

GFP在煙草葉片的瞬時(shí)表達(dá)（LUYOR-3415RG激發(fā)光源照射下發(fā)出綠色熒光）

瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的區(qū)別 

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指不參與將外源DNA整合到真核細(xì)胞基因組中的轉(zhuǎn)染方法，而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是指參與將外源DNA整合到真核細(xì)胞基因組中的轉(zhuǎn)染方法。 因此，這解釋了瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別。

檢測(cè)所需的時(shí)間:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染檢測(cè)需要3-4周才能完成，而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染需要12-18周才能完成。 

遺傳變化:真核細(xì)胞中的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不會(huì)改變，而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染會(huì)在真核細(xì)胞中產(chǎn)生性的遺傳變化。 

傳給后代: 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不允許外源DNA代代傳遞，而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染允許外源DNA代代相傳。 

基因表達(dá)周期:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染允許基因表達(dá)短時(shí)間長(zhǎng)達(dá)24至96小時(shí)，而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染允許基因表達(dá)更長(zhǎng)的時(shí)間。 

表達(dá)式級(jí)別:雖然瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的表達(dá)水平相對(duì)較低，但穩(wěn)定轉(zhuǎn)染具有高而穩(wěn)定的表達(dá)。 

成本:瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的另一個(gè)區(qū)別是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染相對(duì)便宜，而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染昂貴。 

應(yīng)用 

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染對(duì)于短期基因表達(dá)研究（包括小規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)和基因敲低測(cè)定）非常重要，而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染對(duì)于長(zhǎng)期基因調(diào)控、大規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)、穩(wěn)定細(xì)胞系的產(chǎn)生、基因治療等非常重要。 

結(jié)論 

簡(jiǎn)而言之，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是一種外源基因不整合到真核細(xì)胞基因組中的轉(zhuǎn)染類(lèi)型。因此，外來(lái)基因不會(huì)經(jīng)過(guò)幾代細(xì)胞。此外，這種類(lèi)型的轉(zhuǎn)染僅允許在短時(shí)間內(nèi)表達(dá)外源基因。另一方面，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是另一種類(lèi)型的轉(zhuǎn)染，其中外源基因整合到真核細(xì)胞的基因組中。因此，外源基因會(huì)經(jīng)過(guò)幾代細(xì)胞。此外，外源基因的表達(dá)發(fā)生在更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)。因此，瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別在于將外源基因整合到真核細(xì)胞的基因組中。

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