GFP和YFP激發(fā)光和發(fā)射光波長

 上海峰志儀器有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)便攜式熒光蛋白激發(fā)光源，能夠觀察GFP、YFP、RFP在種子、愈傷、葉片、根系以及老鼠、斑馬魚上的表達。

綠色熒光蛋白(GreenFluorescent Protein，簡稱GFP）是在美國西北海岸所盛產(chǎn)的一種名為Aequorea victoria的水母中發(fā)現(xiàn)的一種可以發(fā)出綠色熒光的蛋白質(zhì)。GFPzui早是在1962年由日本科學(xué)家下村修發(fā)現(xiàn)，是由238氨基酸組成的單體蛋白質(zhì)，蛋白分子量約為27kD。GFP的晶體結(jié)構(gòu)顯示，蛋白質(zhì)中央是一個圓柱形水桶樣結(jié)構(gòu)，長420nm，寬240nm，由11個圍繞中心α螺旋的反平行β折疊組成，桶的頂部由3個短的垂直片段覆蓋，底部由一個短的垂直片段覆蓋，對熒光活性很重要的生色團則位于桶的大空腔內(nèi)。實驗表明GFP熒光產(chǎn)生的前提是桶狀結(jié)構(gòu)完整性，去除N端6個氨基酸或C端9個氨基酸，GFP均會失去熒光。原因是GFP生色團的形成效率較低，而且形成過程受外界環(huán)境影響較大。

GFP主要使用什么波段的激發(fā)光？你觀察到得熒光是什么顏色？

GFP在藍光或紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。綠色熒光蛋白基因是目前應(yīng)用的報告基因之一，檢測方便，只需激發(fā)光源，不需任何底物或輔助因子；材料可活體觀測，無需預(yù)處理；植物本身無綠色熒光，不會有假陽性。因此，它目前在動物、植物、微生物的研究中已得到廣泛的應(yīng)用。

植物病毒表達載體（GFP或eGFP，RFP),農(nóng)桿菌侵染植株后，如果要觀察GFP發(fā)光，需要選用LUYOR-3415RG激發(fā)光源來照射植物，同時需要佩戴美國路陽專用的熒光觀察眼鏡，即可觀察到明亮的GFP熒光。LUYOR-3415RG的雙波段光源能夠激發(fā)GFP,eGFP和RFP，無論是綠色熒光蛋白還是增強型綠色熒光蛋白以及紅色熒光蛋白，LUYOR-3415RG均能夠激發(fā)出明亮的熒光，如果需要拍照，需要選用路陽專用遮光片才可以拍到熒光。路陽中國地區(qū)免費請根據(jù)網(wǎng)頁底部聯(lián)系方式聯(lián)系：4006-254-365.也可免費申請樣機試用。

GFP變體的激發(fā)和發(fā)射數(shù)據(jù)

YFP激發(fā)波長和發(fā)射波長

黃色熒光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體，來源于維多利亞多管水母（ Aequorea victoria）。相對于綠色熒光蛋白，其熒光向紅色光譜偏移，而這主要是由于蛋白203位蘇氨酸變?yōu)槔野彼?。其更大激發(fā)波長為514 nm，更大發(fā)射波長為527 nm。excitation wavelength and the emission wavelength for yfp.

Yellow  Fluorescent Proteins Excitation Emission

如何能觀測YFP黃色熒光蛋白的表達？

美國路陽生產(chǎn)有多款便攜式激發(fā)光源，無需熒光顯微鏡就能輕松觀察篩選黃色熒光蛋白表達陽性。LUYOR-3260CY便攜式Y(jié)FP激發(fā)光源能直接分選YFP表達陽性的植株，能夠分選愈傷組織、植株、種子、菌落等。如欲進一步了解便攜式熒光蛋白激發(fā)光源，可直接聯(lián)系上海峰志儀器有限公司的銷售客服。

上圖為黃色熒光蛋白（YFP）在線蟲上的表達（體視顯微鏡熒光適配器下觀察效果）

上圖為GFP在煙草葉片的表達（LUYOR-3415RG激發(fā)光源照射下觀察的效果）

Yellow Fluorescent Proteins/常用黃色熒光蛋白的激發(fā)波長和發(fā)射波長

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