點(diǎn)板254nm和365nm紫外燈

點(diǎn)板254nm和365nm紫外燈

LEAC-280L是為點(diǎn)板實(shí)驗(yàn)用的紫外燈，內(nèi)置了一根8w 254nm短波紫外線燈管和一根8w 365nm長(zhǎng)波紫外線燈管，配有高效紫外濾光片，能夠?qū)?0%以上可見(jiàn)光過(guò)濾掉，讓點(diǎn)板顯色更清晰明亮；LEAC-280L紫外燈外殼采用了鋁合金材料，散熱快，能夠滿足長(zhǎng)時(shí)間工作。LEAC-280L帶有手柄，可手提觀察，也可選配臺(tái)式支架和LCM-26A紫外觀察箱。

點(diǎn)板用雙波長(zhǎng)紫外燈LEAC-280L(254nm和365nm）采用船型開(kāi)關(guān)設(shè)計(jì)，一鍵轉(zhuǎn)換254nm和265nm波長(zhǎng)，操作方便。配套的黑色支架阻隔可見(jiàn)光，讓顯色更清晰。

薄層色譜（TLC）是一種非常有用的跟蹤反應(yīng)的手段，還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠。流動(dòng)相則是一種極性待選的溶劑。將溶液中的反應(yīng)混合物點(diǎn)在薄板上，然后利用毛細(xì)作用使溶劑（或混合溶劑）沿板向上移動(dòng)進(jìn)行展開(kāi)。根據(jù)混合物中組分的極性，不同化合物將會(huì)在薄板上移動(dòng)不同的距離。極性強(qiáng)的化合物會(huì)“粘”在極性的硅膠上，在薄板上移動(dòng)的距離比較短。而非極性的物質(zhì)將會(huì)在流動(dòng)的溶劑相中保留較長(zhǎng)的時(shí)間從而在板上移動(dòng)較大的距離?；衔镆苿?dòng)的距離大小用Rf值來(lái)表達(dá)。這是一個(gè)位于0～1之間的數(shù)值，它的定義為：化合物距離基線（先點(diǎn)樣時(shí)已經(jīng)確定）的距離除以溶劑的前鋒距離基線的距離。

薄層色譜（TLC）實(shí)驗(yàn)步驟：

1) 切割薄板。通常，買來(lái)的硅膠板都是方形的玻璃板，必需用鉆石頭玻璃刀按照模板的形狀進(jìn)行切割。在切割玻璃之前，用尺子和鉛筆在薄板的硅膠面上輕輕地標(biāo)出基線的位置（注意不要損壞硅膠面）。借助鋒利的玻璃切割刀和一把引導(dǎo)尺，你便可方便地進(jìn)行玻璃切割。當(dāng)整塊玻璃被切割后，你就可以進(jìn)一步將其分成若干獨(dú)立的小塊了。（開(kāi)始的時(shí)候，也許你會(huì)感到有一些難度，但經(jīng)過(guò)一些訓(xùn)練以后，你便會(huì)熟練地掌握該項(xiàng)技術(shù)。）

2) 選取合適的溶劑體系?；衔镌诒“迳弦苿?dòng)距離的多少取決于所選取的溶劑不同。在戊烷和己烷等非極性溶劑中，大多數(shù)極性物質(zhì)不會(huì)移動(dòng)，但是非極性化合物會(huì)在薄板上移動(dòng)一定距離。相反，極性溶劑通常會(huì)將非極性的化合物推到溶劑的前段而將極性化合物推離基線。一個(gè)好的溶劑體系應(yīng)該使混合物中的化合物都離開(kāi)基線，但并不使化合物都到達(dá)溶劑前端，Rf值好在0.15~0.85之間。雖然這個(gè)條件不一定都能滿足，但這應(yīng)該作為薄層色譜分析的目標(biāo)（在柱色譜中，合適的溶劑應(yīng)該滿足Rf在0.2~0.3之間）。那么，應(yīng)該選取哪些溶劑呢？一些標(biāo)準(zhǔn)溶劑和他們的相對(duì)極性列于如下：

強(qiáng)極性溶劑：

甲醇〉乙醇〉異丙醇

中等極性溶劑：

乙腈〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯

非極性溶劑：

環(huán)己烷，石油醚，己烷，戊烷

常用混合溶劑：

乙酸乙酯/己烷：常用濃度0~30%。但有時(shí)較難在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上完全除去溶劑。

乙醚/戊烷體系：濃度為0~40%的比較常用。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上非常容易除去。

乙醇/己烷或戊烷：對(duì)強(qiáng)極性化合物5~30%比較合適。

二氯甲烷/己烷或戊烷：5~30%，當(dāng)其他混合溶劑失敗時(shí)可以考慮使用。

3) 將1~2mL選定的溶劑體系倒入展開(kāi)池中，在展開(kāi)池中放置一大塊濾紙。

4) 將化合物在標(biāo)記過(guò)的基線處進(jìn)行點(diǎn)樣。我們用的毛細(xì)管是買來(lái)的，此外，毛細(xì)管也可從加熱過(guò)的Pasteur吸管上拔下。在跟蹤反應(yīng)進(jìn)行時(shí)，一定要點(diǎn)上起始反應(yīng)物、反應(yīng)混合物以及兩者的混合物。

5) 展開(kāi)：讓溶劑向上展開(kāi)約90%的薄板長(zhǎng)度。

6) 從展開(kāi)池中取出薄板并且馬上用鉛筆標(biāo)注出溶劑到達(dá)的前沿位置。根據(jù)這個(gè)計(jì)算Rf的數(shù)值。

7) 讓薄板上的溶劑揮發(fā)掉。

8) 用非破壞性技術(shù)觀察薄板。好的非破壞性方法就是用紫外燈進(jìn)行觀察。將薄板放在紫外燈下，用鉛筆標(biāo)出有紫外活性的點(diǎn)。盡管在5.301中不用這種方法，但我們將采用另一常用的無(wú)損方法——用碘染色法。

9) 用破壞性方式觀測(cè)薄板。當(dāng)化合物沒(méi)有紫外活性的時(shí)候，只能采用這種方法。在各種TLC顯色劑的調(diào)配方法中，提供了很多非常有用的染色劑。使用染色劑時(shí)，將干燥的薄板用鑷子夾起并放入染色劑中，確保從基線到溶劑前沿都被浸沒(méi)。用紙巾擦干薄板的背面。將薄板放在加熱板上觀察斑點(diǎn)的變化。在斑點(diǎn)變得可見(jiàn)而且背景顏色未能遮蓋住斑點(diǎn)之前，將薄板從加熱板上取下。

10) 根據(jù)初始薄層色譜結(jié)果修改溶劑體系的選擇。如果想讓Rf變得更大一些，可使溶劑體系極性更強(qiáng)些；如果想讓Rf變小，就應(yīng)該使溶劑體系的極性減小些。如果在薄板上點(diǎn)樣變成了條紋狀而不是一個(gè)圓圈狀，那么你的樣品濃度可能太高了。稀釋樣品后再進(jìn)行一次薄板層析，如果還是不能奏效，就應(yīng)該考慮換一種溶劑體系。

11) 做好TLC標(biāo)記，計(jì)算每個(gè)斑點(diǎn)的Rf值，并且在筆記本中畫出圖樣。

常見(jiàn)拖尾原因及解決辦法

1、首先考慮的是樣品濃度過(guò)大，薄層板過(guò)載導(dǎo)致。這種情況直接降低樣品濃度或者是上樣量就可以驗(yàn)證了。

2、樣品對(duì)硅膠的吸附能力過(guò)強(qiáng)導(dǎo)致的拖尾。對(duì)不同體系加入不同的調(diào)節(jié)劑，酸體系加冰醋酸或甲酸，堿體系加氨水、三乙胺或二乙胺。

3、展開(kāi)劑的極性與樣品極性不附，不能做到有效展開(kāi)導(dǎo)致。可以通過(guò)調(diào)節(jié)展開(kāi)劑極性解決。

4、如果是長(zhǎng)帶狀，那可能的原因是展開(kāi)劑對(duì)樣品的溶解度不夠所導(dǎo)致?？梢愿鶕?jù)極性表?yè)Q極性相近的對(duì)樣品溶解度更好的溶劑做展開(kāi)劑，另外樣品未溶解完全，點(diǎn)在班上的樣品有未溶固體樣品也會(huì)導(dǎo)致長(zhǎng)條狀拖尾。